O diagnóstico rápido e sensível da sepse agora pode ser realizado com amplificação bifásica em uma matriz de sangue seco

Você consegue diagnosticar uma infecção da corrente sanguínea em 2,5 horas?

Infecções da corrente sanguínea (ICS) e sepse resultam em alta morbidade e mortalidade, particularmente em pacientes gravemente enfermos e neonatos. Os resultados dos pacientes podem ser significativamente melhorados com a administração de antibióticos dentro de três horas após os sintomas iniciais, mas os métodos diagnósticos atuais levam muito mais tempo para diagnosticar ICS/sepse.

O padrão ouro atual para o diagnóstico é a realização de hemocultura — que leva até cinco dias para um resultado negativo — seguida de PCR. A falta de um diagnóstico específico e oportuno também leva à administração de antibióticos de amplo espectro, contribuindo para o surgimento de patógenos resistentes a medicamentos.

Para lidar com a lentidão nos resultados e outros desafios dos testes diagnósticos atuais aprovados pela FDA, pesquisadores de Illinois adotaram uma abordagem de processamento de sangue total. Publicado no início de outubro na PNAS, o módulo de processamento de sangue apresenta uma rede microfluídica e nanofluídica porosa dentro de uma matriz de sangue seco. Dentro dessa matriz, a polimerase pode acessar o DNA e iniciar a “amplificação bifásica”, na qual o fundo heme permanece confinado à fase sólida enquanto os amplicons são enriquecidos no sobrenadante transparente, permitindo a detecção de alterações fluorescentes com sensibilidade a uma única molécula.

Os pesquisadores validaram seu ensaio em 63 amostras clínicas, identificando corretamente todas as amostras sem falsos positivos ou negativos, em comparação com o padrão-ouro, resultando em sensibilidade e especificidade de 100%. Entre os muitos patógenos que eles conseguiram detectar usando apenas 0,8 mL a 1,0 mL de volume sanguíneo inicial, estão bactérias Staphylococcus aureus gram-positivas resistentes e suscetíveis à meticilina (MRSA e MSSA), bactérias E. coli gram-negativas e Candida albicans (um fungo oportunista). Importantemente, essa abordagem bifásica sem cultura reduziu o tempo entre a amostra e o resultado do diagnóstico de ICS/sepse de mais de 20 horas para menos de 2,5 horas, o que pode fazer uma diferença significativa em ambientes com recursos limitados e para pacientes críticos que exigem decisões urgentes de tratamento.

Citado do artigo de ZAHRAA CHORGHAY, PHD em laboratório clínico